一、 前言

潔凈區(qū)的微生物監(jiān)測，屬于潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測的一部分，同時(shí)微生物監(jiān)測屬于質(zhì)量管理部門的相關(guān)工作。

對潔凈區(qū)進(jìn)行微生物監(jiān)測的目的是，評估無菌生產(chǎn)的微生物狀況，確保藥品生產(chǎn)質(zhì)量。

對微生物的監(jiān)測方法有定量空氣浮游菌、沉降菌采樣法和表面取樣法等。

接下我們本期將進(jìn)行沉降菌的監(jiān)測講解

二、沉降菌的監(jiān)測

沉降菌的定義

空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適宜的條件下繁殖可見的菌落數(shù)。

沉降菌菌落數(shù)

規(guī)定時(shí)間內(nèi)每個(gè)平板培養(yǎng)皿收集到空氣中沉降菌的數(shù)目，以個(gè)/皿表示。

進(jìn)行監(jiān)測的要點(diǎn):

三、 監(jiān)測條件

1、溫度和濕度

潔凈室(區(qū))的溫度和濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)（溫度控制在18"C-28C，相對濕度控制在45% 65%之間）

2、壓差

空氣潔凈度不同的潔凈室(區(qū))之間的壓差應(yīng)>5Pa,空氣潔凈度級別要求高的潔凈室(區(qū))對相鄰的空氣潔凈度級別低的潔凈室(區(qū))一般要求呈相對正壓。

3、測試狀態(tài)

① 靜態(tài)或動態(tài)均可進(jìn)行測試。

② 靜態(tài)測試時(shí)室內(nèi)測試人員不得多于2人。

③ 測試報(bào)告中應(yīng)標(biāo)明測試狀態(tài)及室內(nèi)測試人數(shù)。

4、測試時(shí)間

① 靜態(tài)a測試時(shí)，對非單向流潔凈室，測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開始。

② 靜態(tài)b測試時(shí)，對非單向流潔凈室，測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20min自凈后開始。

③ 在動態(tài)測試時(shí)，須記錄生產(chǎn)開始的時(shí)間及測試時(shí)間。

四、不同潔凈區(qū)的注意事項(xiàng)

靜態(tài)A:潔凈室(區(qū))在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已安裝完畢且功能完備的情況下，生產(chǎn)工藝設(shè)備已安裝、潔凈室(區(qū))內(nèi)沒有生產(chǎn)人員的狀態(tài)。

靜態(tài)B:潔凈室(區(qū))在生產(chǎn)操作全部結(jié)束，生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20min自凈后。

動態(tài):潔凈室(區(qū))已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)，設(shè)備在指定的方式下進(jìn)行，并且有指定的人員按照規(guī)范操作。

五、測試步驟

1、選擇合格的一次性成品培養(yǎng)基，測試前培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒，按采樣點(diǎn)布置圖逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。

2、靜態(tài)測試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為30min;動態(tài)測試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為3h。

3、全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、采用大豆酪蛋白瓊脂平板經(jīng)采樣后，在30*C~35*C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于2d;

5、采用沙氏培養(yǎng)基(SDA)平板經(jīng)采樣后，在20C~25*C培養(yǎng) 箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于5d。

每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。

菌落計(jì)數(shù)

1、用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。

2、若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。

采樣次數(shù):每個(gè)采樣點(diǎn)一-般采樣一次。

六、采樣位置及采樣點(diǎn)及分布

1、工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地0.8m~1.5m左右，(略高于工作面) ;

2、可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點(diǎn)。

七、最少培養(yǎng)皿數(shù)

10萬級最少培養(yǎng)皿數(shù)為2個(gè)。結(jié)果評定：

1、每個(gè)測點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)必須低于所選定評定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。

2、在靜態(tài)測試時(shí)，若某測點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重新采樣兩次，

兩次測試結(jié)果均合格才能判為符合。